Isolasi Mikroba

Isolasi adalah suatu proses pemisahan dan pemindahan bakteri dari lingkungan lama untuk menumbuhkannya di suatu medium buatan agar diperoleh biakan yang murni dalam medium buatan. Biakan murni merupakan biakan yang terdiri atas satu spesies bakteri yang ditumbuhkan pada medium buatan. Isolasi bertujuan untuk menumbuhkan mikroba tunggal dalam satu medium.

Metode Isolasi

Terdapat beberapa metode untuk isolasi mikroba yaitu metode cawan gores (streak plate), cawan tuang (pour plate), dan sebar (spread plate). Terdapat beberapa jenis teknik metode cawan gores yang dilakukan yaitu goresan T, goresan radian, goresan kuadran, goresan persegi dan goresan langsung. Metode cawan tuang yaitu agar miring dan agar tegak. Metode yang sering digunakan yaitu metode cawan gores dan metode cawan tuang. Prinsip dari kedua metode ini sama, yaitu mengencerkan biakan campuran hingga setiap spesies dapat dipisahkan, sehingga setiap koloni yang terbentuk adalah hasil pembelahan satu sel.

Teknik Penanaman dengan Goresan

Sumber: Google Gambar

1. Goresan T

Prosedur kerjanya yaitu cawan petri dibagi menjadi tiga bagian. Setelah itu setiap bagian yang telah dibagi digores menggunakan ose bulat secara zig-zag.

2. Goresan Kuadran

Prosedur kerjanya yaitu media digores menggunakan ose bulat dan membentuk persegi yang tidak terputus.

3. Goresan Radian

Prosedur kerjanya yaitu media digores menggunakan ose bulat dan awalnya digores secara zig-zag pada permukaan media dan setelah itu garis lurus yang berlawanan garis zig-zag.

4. Goresan Sinambung

Prosedur kerjanya yaitu media digores menggunakan ose bulat dan digores secara zig-zag.

Agar Miring dan Agar Tegak

 Agar miring adalah media pertumbuhan mikroba pada tabung reaksi yang pada saat didinginkan diletakkan pada kondisi miring. Agar miring merupakan salah satu cara biakan murni yang bersifat aerobik fakultatif. Agar tegak adalah media pertumbuhan mikroba pada tabung reaksi yang pada saat didinginkan diletakkan pada kondisi tegak. Agar tegak digunakan untuk biakan murni yang bersifat anaerob.

Sumber: Google Gambar

Ose Bundar dan Ose Jarum

Ose berfungsi memindahkan suatu koloni ke suatu media lainnya. Ose terbagi menjadi dua yaitu ose bundar dan ose jarum. Ose bundar digunakan pada media agar miring maupun menggores pada cawan sedangkan ose jarum digunakan pada media agar tegak.

Ose Bulat                                                                    Ose Jarum                                               

Hal yang Harus diperhatikan dalam Mengisolasi Bakteri

1. Sifat-sifat spesies mikrobia yang akan diisolasi.
2. Tempat hidup atau asal mikrobia tersebut.
3. Medium untuk pertumbuhannya yang sesuai.
4. Cara menanam mikrobia tersebut.
5. Cara inkubasi mikrobia tersebut.
6. Cara menguji bahwa mikrobia yang diisolasi telah berupa biakan murni dan sesuai dengan yang dimaksud.
7. Cara memelihara agar mikrobia yang telah diisolasi tetap merupakan biakan murni.

Sumber:

Hadioetomo, R. S., 1993, Mikrobiologi          Dasar dalam Praktek, Jakarta : Gramedia.

Jutono, J. 1980. Pedoman Praktikum Mikroiologi Umum Untuk Perguruan Tinggi. Penerbit                         Departemen Mikrobiologi Fakultas Pertanian Universitas Gajah Mada. Yogyakarta.

Pelczar,Michael J. ECS. Chan. 2007. Dasar-dasar mikrobiologi. UI Press : Jakarta.